1、①. G1期检验点:DNA是否损伤,细胞外环境是否适宜,细胞体积是否足够大。②. S期检验点: DNA是否复制完成。③. G2期检验点:DNA是否损伤,细胞体积是否足够大。④. M期检验点:纺锤体是否连到染色体上。
2、其转运点如下:G1/S检查点:位于G1期与S期之间,主要检测细胞是否具备进入DNA复制的条件,如是否已经完成DNA损伤修复、是否有足够的核苷酸等。
3、间期是细胞合成DNA、RNA、蛋白质和各种酶的时期,是为细胞分裂准备物质基础的主要阶段。
单个细胞的周期测定可采用缩时摄影的方法,但它不能代表细胞群体的周期,故现多采用其他方法测群体周期。
③75%乙醇(-20℃预冷)固定细胞1h。④加入PI(终浓度50g/mL)和无DNA酶污染的RNA酶(终浓度50g/mL)1mL染色30min~1h。
离心收集细胞,弃上清,用预冷PBS洗细胞两次(加3ml,吹悬,离心,弃上清算洗一次)。加入3ml预冷(-20度)70%乙醇到细胞沉淀中,于4度固定过夜(或者,如果实验周期长可以-20℃长期固定)。
细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细胞仪对细胞进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情况,可以进行细胞周期和细胞凋亡分析。
细胞周期分析原理和分析结果解释细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程,所需的时间叫细胞周期时间。
比。细胞内的DNA被碘化丙啶染色后,可以用流式细仪对细抱进行DNA含量测定,然后根据DNA含量的分布情兄,可以进行细周期和细 凋亡分析。
细胞周期测定实验原理:体外培养细胞生长、分裂繁殖的能力,可用分裂指数来表示。它与生长曲线有一定的联系,如随着分裂指数的不断提高,细胞也就进入了指数生长期。
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