克隆形成实验,克隆形成实验怎么拍照

克隆形成实验和细胞增殖实验的区别

1、细胞集落形成率 单个细胞在体外增殖6代以上，其后代所组成的细胞群体，称为集落或克隆。每个克隆含有50个以上的细胞，大小在0.3-0mm 之间。集落形成率表示细胞独立生存能力。

2、博凌科为解做克隆形成实验首先需要在平皿或孔板中接种相同数量的处理过的细胞，所以需要计数细胞后再种于平皿或孔板中。

3、细胞增殖 常用来检测细胞增殖的方法是CCK8法和Brdu法。CCK8主要通过分光光度计进行检测，OD只越高，说明存活的细胞越多，增殖能力强。

4、在有丝分裂的过程中， 2 倍体的体细胞在经过有丝分裂之后， 产生两个都是 2 倍体的后代细胞；另一种是性生殖细胞所采用的增殖方式， 被称为减数分裂。

平板克隆形成实验什么时候加药

铺满细胞后，加药培养两周，可见白点克隆时停止培养，用遇冷的甲醇固定细胞15min，结晶紫染色30分钟，用流动水清洗。

可以不加，有时候加了会有拮抗作用。1）24孔板内以5~8x104cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。

博凌科为解做克隆形成实验首先需要在平皿或孔板中接种相同数量的处理过的细胞，所以需要计数细胞后再种于平皿或孔板中。

⒎实验时应设置调零孔，对照孔，加药孔。调零孔加培养基、mtt、二甲基亚砜。对照孔和加药孔都要加细胞、培养液、mtt、二甲基亚砜，不同的是对照孔加溶解药物的介质，而加药组加入不同浓度的药物。⒏避免血清干扰。

软琼脂克隆形成实验怎么染色

1、经常观察，当培养皿中出现肉眼可见的克隆时，终止培养。弃去上清液，用PBS小心浸洗2次。加4%多聚甲醛固定细胞5mL固定15分钟。然后去固定液，加适量GIMSA应用染色液染10～30分钟，然后用流水缓慢洗去染色液，空气干燥。

2、设置实验环境：选择一个干净、明亮的实验台面或工作区，并确保有适当的照明。安置样品：将软琼脂克隆结果放置在一个清晰可见的位置。可以使用透明的密封盒、玻璃片或琼脂培养皿等容器来展示克隆结果。

3、琼脂雕制作方法：将琼脂用水放在火上熬化倒入模具冷却即可。（琼脂适当的稠一些 出来的琼脂雕就硬一些 反之就软一些，模具开口处可以用保鲜膜包紧，也可用胶带粘上。

细胞克隆形成实验试验步骤

1、将平皿倒置并叠加一张带网格的透明胶片，用肉眼直接计数克隆，或在显微镜(低倍镜)计数大于10个细胞的克隆数。最后计算克隆形成率。克隆形成率= (克隆数/接种细胞数)×100%。

2、学会细胞克隆形成的辩观察技能；配合抗体分泌细胞筛选技术，确定抗体分泌细胞。

3、）24孔板内以5~8x104cells/孔的密度铺板，铺足够量的孔以进行后续的梯度实验。

4、细胞克隆形成率即细胞接种存活率，表示接种细胞后贴壁的细胞成活并形成克隆的数量。贴壁后的细胞不一定每个都能增殖和形成克隆，而形成克隆的细胞必为贴壁和有增殖活力的细胞。